Vyučující
|
-
Berka Karel, doc. RNDr. Ph.D.
-
Hof Martin, prof. Dr. Ph.D.
|
Obsah předmětu
|
Hlavní pozornost je zaměřena na získání základních poznatků z oblasti "steady-state" a časově rozlišených fluorescenčních spekter, teorie jejich vzniku a interpretace. Teoretické základy jsou doplněny praktickými příklady nejen klasických analytických aplikací, ale i soudobé využití těchto metod při studiu vlastností biologických a chemických systémů - jako jsou mikroviskozita, relaxační časy solvátových vrstev, studium strukturních změn bílkovin. Sylabus: 1 Influence of quenching on fluorescence quantum yield and lifetime 1.1 Fluorescence quantum yield and lifetime 1.2 Fluorescence quencher 1.2.1 Solute quenching 1.2.2 Example for application of solute quenching in protein studies 1.2.3 Solvent quenching 1.2.4 Self quenching 1.2.5 Trivial quenching 2 Influence of solvent relaxation on steady-state and time-resolved fluorescence spectra 2.1 Basic principles of solvent relaxation 2.2 Influence of solvent relaxation on steady-state spectra 2.2.1 Non-viscous solvents 2.2.2 Viscous and virtified solutions 2.3 Quantitative characterisation of solvent relaxation by time-resolved spectroscopy 2.3.1 Time-resolved emission spectra 2.3.2 Example for using solvent relaxation for probing micro-polarities 3 Information included in polarized fluorescence 3.1 Introduction 3.2 Definition of polarization and anisotropy 3.3 Steady-state fluorescence anisotropy 3.4 Time-resolved fluorescence polarization 4 Using fluorescence resonance energy transfer as a spectroscopic ruler 4.1 Donor-acceptor pairs at fixed distances 4.2 Donor-acceptor pairs at variable distances 4.3 Some applications of fluorescence resonance energy transfer 5 Information gained from excimer formation studies 6 Utilization of irreversible photobleaching 7 Detection of single molecules by fluorescence
|
Studijní aktivity a metody výuky
|
Dialogická (diskuze, rozhovor, brainstorming)
- Příprava na zkoušku
- 0 hodin za semestr
|
Výstupy z učení
|
Cílem přednášky je seznámit studenty se základy fluorescenční spektroskopie a příbuzných metod.
Hodnotit konkrétní metody a postupy, vysvětlit výsledky týkající se fluoroscenční spektroskopie
|
Předpoklady
|
nespecifikováno
|
Hodnoticí metody a kritéria
|
Ústní zkouška
|
Doporučená literatura
|
-
Ganglitz G. (ed.). (1998). Handbook of Spectroscopy. Weinheim.
-
Lakowicz, J. (1999). Principle of fluorescence spectroscopy. Kluwer.
-
Prosser, V. a kol. (1989). Experimentální metody biofyziky. Academia Praha.
-
Slavík, J.. (1994). Fluorescent Probes in Cellular and Molecular Biology. CRC Press.
|