|
Vyučující
|
-
Vrzalová Aneta, Mgr. Ph.D.
|
|
Obsah předmětu
|
Techniky a zásady práce s lidskými buněčnými nádorovými liniemi za sterilních podmínek. Kultivace lidských hepatomových HepG2 buněk, trypsinizace a pasážování buněk, určení počtu a životnosti buněk, vysetí buněk. Transientní transfekce buněk reportérovým plasmidem technikou lipofekce. Design farmakologického experimentu, příprava roztoků agonistů a antagonistů, nasazení testovaných látek na transientně transfekované HepG2 buňky. Lýza buněk permeabilizací surfaktantemu, stanovení katalytické aktivity světluškové luciferasy s využitím automatického chemiluminimetru. Výpočet hodnot IC50 pro antagonistu a EC50 pro agonistu.
|
|
Studijní aktivity a metody výuky
|
|
nespecifikováno
|
|
Výstupy z učení
|
Seznámení se s praktickou realizací moderních molekulárně-biologických technik ? práce s nádorovými buněčnými liniemi, reporter gene assay.
Po absolvování kurzu je student schopen: - využit získaných dovedností v rutinní praxi v akademické či výzkumné sféře - pracovat za sterilních podmínek s lidskými nádorovými liniemi - práce metodou transientní transfekce technikou lipofekce - měření luciferasové aktivity a tzv. reporter gene assay
|
|
Předpoklady
|
nespecifikováno
KBB/MTSB
|
|
Hodnoticí metody a kritéria
|
Analýza výkonů studenta, Didaktický test
100% účast na cvičeních, 70% test
|
|
Doporučená literatura
|
|